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  3. Medizinische Fakultät - Digitale Hochschulschriften der LMU - Teil 05/19 Podcast
  4. Molekulare Effekte von GABA in adulten - und TM3 Leydig-Zellen
In dieser Arbeit wurde das GABAerge System in Leydig-Zellen
detailliert analysiert. Mehrere GABAA und GABAC Rezeptor
Untereinheiten sowie das GABA synthetisierende Enzym GAD 67 und der
vesikuläre GABA Transporter VIAAT konnten mit RT – PCR, Western
Blot und Immunfluoreszenz-Experimenten in TM3, Leydig-Tumorzellen,
und primären adulten Leydig-Zellen nachgewiesen werden. Es gelang
molekulare Signaltransduktionswege von GABA aufzudecken: Gen Array,
Western Blot und semiquantitative RT – PCR Experimente zeigten,
dass GABA und der GABAA Rezeptor Agonist Isoguvacin den
Transkriptionsfaktor egr-1 in TM3 und adulten Leydig-Zellen
induzieren. Western Blot Experimente lassen schließen, dass GABA
vermittelt über GABAA Rezeptoren die MAP – Kinasen ERK 1/2 in TM3
Zellen phosphoryliert und somit in den enzymatisch aktiven Zustand
überführt. In primären adulten Leydig-Zellen konnte weiterhin
gezeigt werden, dass GABA die Testosteron Produktion steigert.
Elektrophysiologische Untersuchungen der TM3 und der primären
adulten Leydig-Zellen zeigten schließlich, dass das initiale GABA
Signal nicht über einen für GABAA Rezeptor typischen Cl--Strom
vermittelt wird. Die RT – PCR Analyse von postnatalen Mäusehoden
ergab ebenfalls, dass GAD 67, VIAAT und mehreren GABAA und GABAC
Rezeptor Untereinheiten in dieser Entwicklungsphase des Hodens
anwesend sind und lieferten ferner Hinweise dafür, dass sich
insbesondere die Expression der Rezeptor Untereinheiten in der
postnatalen Periode im Hoden ändert. Darüber hinaus konnte
nachgewiesen werden, dass proliferierende interstitielle Zellen im
postnatalen Rattenhoden immunopositiv für egr-1 sind. Somit ist
eine physiologische Funktion von egr-1 in dieser Phase der
Leydig-Zellentwicklung plausibel.

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