Der Einfluss von Yersinia-Effektoren auf podosomale Adhäsionsstrukturen primärer humaner MAkrophagen

Podosomen sind aktinreiche Strukturen des Zytoskeletts primärer
humaner Makrophagen. Für Adhäsion, Polarisation und Chemotaxis sind
diese Strukturen von essentieller Bedeutung. Ihr ständiger Umbau
und ihre Regulation unterliegt einer fein abgestimmten Balance der
Rho GTPasen Rho, Rac und Cdc42. Pathogene Yersinien spp. haben
Aktinzytoskelett von Wirtszellen durch Modulation von Rho GTPasen
als Angriffsobjekt gewählt. Mit ihrem plasmidkodierten Typ III
Sekretions- und Translokationsapparat werden wichtige
Immunfunktionen paralysiert. In dieser Arbeit wurde in primären
humanen Makrophagen der Einfluss von Yersinien-Effektoren auf
Podosomen untersucht. Konkret interessierte die Frage, welchen
Effekt YopE auf diese Strukturen hat. Hierzu wurden in einem
standardisierten Verfahren gewonnene und gereinigte Makrophagen
gesunder Spender mit unterschiedlichen Mutanten der Spezies
Yersinia enterocolitica für verschiedene Zeiten infiziert. Nach
Färbung der Zellen mit Rhodamin-Phalloidin wurde die Anzahl der
verbliebenen Zellen mit Podosomen im konfokalen Mikroskop ermittelt
und statistisch ausgewertet. Es konnte erstens gezeigt werden, daß
ein voll virulenter Yersinien Stamm in der Lage ist, nach einer
Infektion von bereits 30 min die podosomalen Strukturen der
Makrophagen vollkommen zu zerstören. Zweitens sind an diesem Effekt
verschiedene Yersinien-Effektoren und zusätzlich der Typ III
Sekretions- und Translokationsapparat beteiligt. Drittens reicht
YopE für die Zerstörung von Podosomen alleine aus. Viertens ist die
GAP-Aktivität von YopE für die Destruktion von Podosomen nicht
notwendig und lässt auf GAP-unabhängige Mechanismen von YopE
schliessen. Zusammenfassend lassen die Ergebnisse dieser Arbeit
vermuten, daß YopE ein wichtiger aber nicht der alleinige Effektor
der Yersinien bei der Paralyse von menschlichen Makrophagen und
insbesondere der Zerstörung podosomaler Adhäsionsstrukturen ist.