podcast.de
Anmeldung
Anmeldung Registrierung
Auto Hell Dunkel
Erweiterte Suche
  1. Startseite
  2. Podcasts
  3. Tierärztliche Fakultät - Digitale Hochschulschriften der LMU - Teil 01/07 Podcast
  4. Klonierung und Mutagenese des Bovinen Herpesvirus Typ 1 als ein infektiöses künstliches bakterielles Chromosom (bacterial artificial chromosome, BAC)
For the first time the complete BHV-1 Schönböken genome was cloned
as an infectious bacterial artificial chromosome (BAC), by
inserting mini F plasmid sequences into the glycoprotein E (gE)
open reading frame (ORF). DNA of the resulting BAC clone pBHV-1DgE
was transfected into permissive bovine kidney cells and infectious
BHV-1DgE could be recovered. Using RecE/T cloning in Escherichia
coli BHV-1 genomes with a deletion of either glycoprotein G (gG) or
gM or gK in addition to gE (pBHV-1DgE-gG, pBHV-1DgE-gM and
pBHV-1DgE-gK) were generated. The recombinant viruses with a
simultaneous deletion of gE and gG (BHV-1DgE-gG) or gE and gM
(BHV-1DgE-gM), respectively, were reconstituted after transfection
of manipulated BAC DNA into eukaryotic cells. However, no virus
could be recovered after transfection of recombinant pBHV-1DgE-gK
DNA, suggesting that gK is likewise essential for the replication
of BHV-1 as demonstrated for other alphaherpesviruses. Growth
properties of the other BAC derived virus mutants BHV-1DgE,
BHV-1DgE-gG and BHV-1DgE-gM were analysed in vitro. The mutant
viruses exhibited no markedly lowered virus titres compared to wild
type strain Schönböken. However, BHV-1DgE specific virus plaques
were reduced by 45% compared to BHV-1 Schönböken as assessed by
plaque size measurement. Plaques sizes of BHV-1DgE-gG and
BHV-1DgE-gM were reduced by 56% (BHV-1DgE-gG) and 54%
(BHV-1DgE-gM). The observations made here emphasize the influence
of gE, gG and gM on the BHV-1 cell-to-cell spread. Moreover, they
clearly demonstrate that viral cell-to-cell spread is slightly more
inhibited by a simultaneous deletion of gE and gG or gE and gM than
by a single gE deletion. Comparing the plaque sizes of BHV-1DgE,
BHV-1DgE-gG and BHV-1DgG it could be shown that gE and gG function
independently from each other in cell-to-cell spread, because an
additive and no synergistic effect was observed in the gE-gG double
deletion mutant. These studies illustrate, that the propagation and
manipulation of herpesviruses in bacterial systems provides the
advantage of a more rapid and accurate generation and
characterisation of BHV-1 deletion mutants over conventional
cloning procedures. In conclusion the new technique will allow the
fast generation of BHV-1 mutants as well as the investigation for
their suitability as future (marker) vaccines.

Weitere Episoden

Einfluss Seltener Erden in Verbindung mit phytogenen Zusatzstoffen auf Leistungsparameter beim Ferkel

Einfluss Seltener Erden in Verbindung mit phytogenen Zusatzstoffen auf Leistungsparameter beim Ferkel

vor 21 Jahren
Auswirkungen von "Gentling"-Programmen auf das Verhalten von Laborratten (Wistar)

Auswirkungen von "Gentling"-Programmen auf das Verhalten von Laborratten (Wistar)

vor 21 Jahren
Feldstudie zur kolostralen Immunglobulin-Versorgung neugeborener Kälber in Abhängigkeit von der Verweildauer beim Muttertier

Feldstudie zur kolostralen Immunglobulin-Versorgung neugeborener Kälber in Abhängigkeit von der Verweildauer beim Muttertier

vor 21 Jahren
Durchflusszytometrische Verfahren zur Beurteilung der Spermaqualität nach einer experimentell induzierten Hyperthermie am Bullenhoden

Durchflusszytometrische Verfahren zur Beurteilung der Spermaqualität nach einer experimentell induzierten Hyperthermie am Bullenhoden

vor 21 Jahren
Evaluation des vollautomatischen Hämatologiegerätes CELL-DYN 3500 im klinischen Einsatz bei Hund und Katze

Evaluation des vollautomatischen Hämatologiegerätes CELL-DYN 3500 im klinischen Einsatz bei Hund und Katze

vor 21 Jahren
Alle Episoden anzeigen
In Podcasts werben
Schalte jetzt Werbung in Podcasts.
Episode melden

„Klonierung und Mutagenese des Bovinen Herpesvirus Typ 1 als ein infektiöses künstliches bakterielles Chromosom (bacterial artificial chromosome, BAC)“

Worum geht es? Danach fragen wir noch nach dem Grund.

Abonnenten

Teilen

Mein Archiv

Deine Privatkopie der Folgen, die du nicht verlieren willst.

Podcast-Folgen verschwinden. Feeds werden auf die letzten Episoden gekürzt, Hoster räumen alte Dateien ab, Formate wechseln den Anbieter und lassen ihr Archiv zurück. Mit „Mein Archiv“ sichert podcast.de die Folgen deiner Podcasts für dich — angefangen bei den ältesten, denn die sind zuerst weg.

  • Deine gesicherten Folgen bleiben hörbar, auch wenn das Original offline geht.
  • Auch Folgen, die im heutigen Feed gar nicht mehr stehen — podcast.de kennt sie noch.
  • Herunterladen bleibt möglich, solange die Folge beim Podcaster liegt. Der zählt seine Abrufe wie bisher.
Startet bald

Sei beim Start von Mein Archiv dabei

Mein Archiv ist fast fertig. Trag dich ein, dann bekommst du eine E-Mail, sobald es losgeht – und bist von Anfang an dabei. Wir schreiben dir nur zum Start, keine Werbung, keine Weitergabe deiner Daten.

Du bekommst zuerst eine Bestätigungsmail. Abmelden geht jederzeit. Datenschutz