Untersuchungen zur Beteiligung proapoptotischer Signalwege an der YopP - induzierten Apoptose von Makrophagen

Die Exposition von Makrophagen gegenüber Bakterien oder LPS führt
über die Aktivierung zellulärer Signalkaskaden zu einer vermehrten
Expression von Genen, deren Proteinprodukte zelluläres Überleben
unter Infektionsbedingungen ermöglichen. Die Aktivierung des
Transkriptionsfaktors NF - kB spielt dabei eine wichtige Rolle.
Pathogene Yersinia enterocolitica - Stämme hemmen die Aktivierung
von NF - kB und induzieren Apoptose bei Makrophagen. In dieser
Arbeit konnte gezeigt werden, dass das Yersinia - Effektorprotein
YopP maßgeblich an der Apoptoseinduktion beteiligt ist. Bei
Infektionsversuchen konnten lediglich die Yersinienstämme bei
Makrophagen Apoptose induzieren, die über einen funktionstüchtigen
Typ III - Sekretionsapparat und ein dadurch transloziertes YopP
verfügen. Eine transiente Überexpression der transkriptionell
aktiven NF - kB - Untereinheit p65 schützt Makrophagen spezifisch
vor durch Yersinien, nicht jedoch vor durch Salmonellen induzierter
Apoptose. Das weist darauf hin, dass YopP durch die Blockierung des
NF - kB aktivierenden Signalwegs Apoptose bei Makrophagen
vermittelt. Die Transfektion von J774A.1 Makrophagen mit YopP
induzierte bei 40 - 50% der transfizierten Zellen Apoptose. Durch
die zusätzliche Stimulation mit LPS konnte die Apoptoserate auf 80
- 90% gesteigert werde. Dieser synergistische, proapoptotische
Effekt ist direkt auf durch LPS induzierte Signaltransduktions
-prozesse zurückzuführen. Aus Transfektionsversuchen mit dominant -
negativen Signalmolekülen der TLR - Signalkaskade ergaben sich
Hinweise auf eine Beteiligung der Transmitter MyD88 und IRAK2 an
der Apoptoseeinleitung. IRAK1 und TRAF6 scheinen dagegen eher ein
antagonistisches, NF - kB aktivierendes LPS - Signal zu bedienen,
welches unter dem Einfluss von YopP unterdrückt wird. Dadurch
überwiegt das durch LPS induzierte, proapoptotische Signal, welches
den apoptotischen Zelltod einleitet. Die Aktivierung des
Apoptoseprogramms selbst erfolgt über FADD und Caspase - 8.