Bestimmung von Glycerophospholipid gebundenen Fettsäuren in Erythrozyten und Vergleich des Einbaus von Docosahexaensäure in Glycerophospholipide aus Plasma, Erythrozyten und Wangenschleimhautzellen

Unsere Forschungsgruppe hat eine neue, sensitive und robuste
Methode entwickelt, um selektiv die Fettsäuren der
Glycerophospholipidfraktion im Plasma zu bestimmen, welche nur
wenig vom postprandialen Status des Probanden beeinflusst werden.
Bei diesem neuen Verfahren wird die konventionelle Lipidextraktion
und deren Auftrennung durch eine methanolische Ausfällung der
Proteine mit zusätzlicher Ausfällung von Triglyceriden und
Cholesterinestern ersetzt. In Kombination mit basenkatalysierter
Synthese von Methylestern bei Raumtemperatur wird die
ausschließliche Umesterung der Glycerophopholipid (GPL) Fettsäuren
gesichert. In der Vergangenheit hat sich gezeigt, dass sich dieses
Verfahren nicht einfach von Plasma auf Erythrozyten übertragen
lässt, sodass es notwendig war, die Anwendbarkeit der Plasma-GPL
Methode auf Erythrozyten zu überprüfen, zu optimieren und zu
validieren, bevor sie in klinischen Studien Anwendung finden kann.
Im Rahmen dieser Untersuchung bestimmten wir auch den Omega-3-Index
und verglichen diese mit in der Literatur beschriebenen Werten.
Außerdem haben wir eine robuste Methode für die Analyse von
Wangenschleimhaut Glycerophopholipid (GPL) gebundenen Fettsäuren
entwickelt, welche nur wenig Probenmaterial benötigt und einfach
anzuwenden ist. Die genannten Methoden zur Extraktion von GPL
wurden im Rahmen einer klinischen Interventionsstudie evaluiert.
Dabei wurden vor allem der Docosahexanensäure(DHA)-Anstieg im
zeitlichen Verlauf der Studie zwischen den verschiedenen
Kompartimenten Plasma, Erythrozyten und Wangenschleimhautzellen
verglichen und Korrelationen berechnet, um eine Aussage darüber
treffen zu können, welcher Biomarker, welche Änderungen
widerspiegelt und wie geeignet die Analyse von GPL der Fettsäuren
im Vergleich zu langjährig etablierten Markern, wie
Gesamt-Phospholipide ist.