Medizinische Fakultät - Digitale Hochschulschriften der LMU - Teil 10/19 Archiv

Fragestellung: Das PFAPA-Syndrom ist ein erworbenes periodisches Fiebersyndrom (PFS). Das Akronym PFAPA ist zusammengesetzt aus den Leitsymptomen des Krankheitsbildes: Periodisches Fieber, Aphthöse Stomatitis, Pharyngitis und Adenitis. Da es sich aufgrund der unspezifischen Symptomatik und unbekannter Pathogenese um eine Ausschlussdiagnose handelt, stellen sich folgende Fragen: Finden sich bei Patienten mit der klinischen Diagnose PFAPA Mutationen in Genen für bekannte hereditäre PFS und gibt es Überschneidungen mit deren Krankheitsbildern? Methodik: Von Patienten mit der Verdachtsdiagnose PFAPA wurden die demographischen, klinischen und therapiebezogenen Daten sowie die Laborbefunde retrospektiv aus den Akten und einem Patientenfragebogen erhoben. Die molekulargenetische Untersuchung der Gene TNFRSF1A (TNF-Rezeptor-assoziiertes periodisches Syndrom TRAPS; Exons 2-7), MEFV (Familiäres Mittelmeerfieber FMF; Exons 2 und 10), MVK (Mevalonatkinasedefizienz, Hyper-IgD-Syndrom HIDS; Exons 6, 9 und 11) und CIAS1 (Cryopyrin-assoziierte periodische Syndrome CAPS; Exon 3) wurde mittels PCR und Sequenzierung genomischer DNA durchgeführt. Ergebnisse: Untersucht wurden 71 Kinder (51 Jungen (71,8 %), 20 Mädchen (28,2 %)) im Alter von drei bis 17 Jahren (Mittelwert 8,6 Jahre) mit Krankheitsbeginn vor dem fünften Lebensjahr. Bei 55 (77,5 %) der 71 Patienten konnte durch die genetische Untersuchung ein hereditäres PFS ausgeschlossen und so die klinische Verdachtsdiagnose PFAPA-Syndrom bekräftigt werden. Neben den o.g. Kardinalsymptomen traten Schüttelfrost, Kopfschmerzen, Hauterscheinungen, gastrointestinale und muskuloskelettale Symptome auf. Die Entzündungsparameter waren im Fieberschub signifikant erhöht. 16 Patienten (22,5 %) erwiesen sich als Träger von Mutationen, die mit hereditären PFS assoziiert sind. Bei sieben Kindern (9,9 %) wurden Mutationen im TNFRSF1A-Gen gefunden, bei je fünf Kindern (je 7,0 %) Mutationen in den MEFV- und MVK-Genen und bei einem Jungen (1,4 %) eine CIAS1-Mutation. Unter diesen Alterationsträgern waren ein Mädchen mit sowohl einer TNFRSF1A- als auch einer MVK-Mutation und ein Junge mit einer MEFV- und einer TNFRSF1A-Mutation. Zudem wurde eine bisher in der Literatur nicht beschriebene TNFRSF1A-Mutation gefunden. Schlussfolgerung: Der Anteil Mutations-positiver Patienten von 22,5 % rechtfertigt bei Kindern mit klinischem Verdacht auf ein PFAPA-Syndrom die molekulargenetische Untersuchung als einen unverzichtbaren Bestandteil der Diagnostik. Denn nur die adäquate und frühzeitige Therapie eines sonst möglicherweise nicht erkannten und behandelbaren hereditären PFS erhöht die Lebensqualität und bewahrt den Patienten vor diesbezüglich assoziierten Spätschäden wie einer Amyloidose.

The emigration of leukocytes from the circulation is a critical step during immune surveillance and inflammatory reactions that is governed by a coordinated interplay involving a spectrum of adhesion and signal molecules. While a great deal has been learned about the early steps of leukocyte recruitment, i.e. rolling and adhesion, little is known about the subsequent steps, transendothelial and interstitial migration when leukocytes migrate across the endothelial layer lining the blood vessel and move to the sites of inflammation. In particular, it is not fully understood which endothelial receptors are responsible for extravasation of leukocytes into the perivascular space. Moreover, the mechanisms of interstitial migration of leukocytes during inflammation remain to be clarified in vivo. In the first part of the study, we analyzed the role of ESAM for leukocyte migration in vivo. ESAM is a novel adhesion receptor which is specifically expressed at endothelial tight junctions and on platelets. Using RLOT intravital microscopy of the murine cremaster muscle, we have shown that IL-1β-induced leukocyte transmigration was reduced by about 50% in ESAM-deficient mice without affecting leukocyte rolling and adhesion. In summary, ESAM at endothelial tight junctions participates in the migration of neutrophils through the vessel wall. In the second part of the study, we investigated the role of two other recently discovered receptors, CD99 and CD99L2, for leukocyte migration. Similar to ESAM, these receptors are expressed at endothelial cell contacts but did not belong to any of the known protein families. We demonstrate that CD99 and CD99L2 mediate transendothelial migration of neutrophils in vivo without any effect on leukocyte rolling and adhesion. Finally, we show that the inhibitory effect of anti-CD99 and CD99L2 antibodies on cytokine-induced leukocyte transmigration in cremasteric venules is amplified in PECAM-1-/- mice. This fact suggests that a functional relationship between PECAM-1 and CD99/ CD99L2 might exist in mediating leukocyte transmigration. Taken together, our study provides the first evidence for a role of CD99 and CD99L2 in the process of leukocyte transendothelial migration in vivo. In the third part of the study, we established a novel approach allowing the visualization and analysis of directional leukocyte interstitial migration in vivo. Our technique combines RLOT and multicolor fluorescence microscopy with microinjection for local application of chemoattractants. In the mouse cremaster muscle, we show that microinjection of chemoattractants (MIP-1α and PAF) induced directional leukocyte polarization and migration. Combination of RLOT microscopy with fluorescence microscopy allowed simultaneous visualization and analysis of migratory behavior of different leukocyte subsets upon chemotactic stimulation. Moreover, this approach enabled an imaging of subcellular events such as mitochondria redistribution in single polarized interstitially migrating leukocytes in vivo. This technique opens new avenues for investigations of the mechanisms of interstitial migration of leukocytes as well as the observation of morphological changes and subcellular events in different leukocyte subsets during their interstitial migration in vivo.

Electromyogram-Biofeedback in Patients with Fibromyalgia: A Randomized Controlled Trial Objective: To evaluate the effectiveness of EMG-biofeedback in patients with Fibromyalgia. Design: The study design was a randomized controlled pilot trial with blinded assessors and three points of assessment: before intervention (baseline, T0), at the end of treatment (T1) and a 3-months follow-up (T2). Setting: Outpatient clinic. Patients: Patients from the waiting list of the Fibromyalgia day hospital program fulfilling the inclusion criteria. Intervention: During eight weeks, 14 sessions of EMG-biofeedback training versus usual care only. Outcome Measures and Analysis: For primary outcome, the disease specific health status was followed using the Fibromyalgia Impact Questionnaire (FIQ). Secondary outcome measures comprise assessment of pain (Tender Point Score), tenderness (Tender Point Count = number of Tender Points, Pain Pressure Threshold), generic health status (SF-36), Patients’ Global Clinical Impression of Change and psychic impact (Beck depression Inventory, Symptom Checklist 90-Revised). Effects were analyzed with sensitivity statistics (effect size, ES), parametric and nonparametric tests. Results: The data of 36 patients with complete follow-up data could be analyzed. EMG-EMG-biofeedback did not improve health status of patients with Fibromyalgia (FIQ, T1: ES = 0.02, p = 0.95, T2: ES = 0.26, p = 0.43). Also, the secondary outcome measures, with the exception of the pressure pain threshold (T1: ES = 0.26, p = 0.014), showed no superiority of EMG-biofeedback in addition to usual care compared to usual care alone. Conclusion: In the treatment of patients with Fibromyalgia, EMG-biofeedback training in addition to usual medical care is not superior to usual medical care alone.