podcast.de
Anmeldung
Anmeldung Registrierung
Auto Hell Dunkel
Erweiterte Suche
  1. Startseite
  2. Podcasts
  3. Fakultät für Biologie - Digitale Hochschulschriften der LMU - Teil 01/06 Podcast
  4. Neue molekularzytogenetische Strategien für die Analyse seltener Zellen
Aufgrund fehlender Methoden wurde bis zum heutigen Zeitpunkt nur
selten eine molekulargenetische Analyse von Einzelzellen
durchgeführt. In vielen Bereichen aber, wie beispielsweise den
Tumoren, ist sie von entscheidender Bedeutung. Das Auftreten eines
genetisch heterogenen Musters in einem Tumor könnte die Suche nach
krankheitsauslösenden oder -fördernden Veränderungen erschweren.
Auch bei der Untersuchung von seltenen Zellen (so genannte „rare
cell events“), z.B. bei einer minimalen residualen Tumorerkrankung
sind geeignete Methoden zur Einzelzellanalyse notwendig, da nur
wenig Material zur Verfügung steht. Ziel dieser Doktorarbeit war
es, zwei molekulargenetische Analysemethoden zu etablieren,
weiterzuentwickeln und in einer geeigneten Strategie bei der
Untersuchung von disseminierten Tumorzellen bei fünf
Mammakarzinomen einzusetzen. Im ersten Teil der Doktorarbeit
erfolgte die Auswahl eines geeigneten Markierungssystems für die
Identifizierung disseminierter Tumorzellen im Knochenmark. Die
Benutzung des pan-Zytokeratin Antikörpers A45 B/B3 direkt
konjugiert mit dem Fluoreszenzfarbstoff Cy3 oder FluorX zeigte in
verschiedenen Testsystemen die besten Ergebnisse. Sowohl seine
Spezifität als auch die Durchführbarkeit einer
Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) war möglich. Anhand
disseminierter Tumorzellen von Nierentumoren wurde die Möglichkeit
einer Untersuchung mittels zweier Interphase FISH Ansätze
überprüft. Die Hybridisierung der Zentromernahen YAC Sonden konnte
auf dem Knochenmarksgewebe bei pan-Zytokeratin positiven Zellen
nach Erproben mehrerer Protokolle nicht durchgeführt werden,
allerdings war die Hybridisierung von Zentromersonden erfolgreich.
Die Optimierung des veröffentlichten Protokolls zur Einzelzell CGH
(C. Klein et al. 1999; N. Stöcklein et al.2002) war das zweite Ziel
der Arbeit. Diese Optimierung war notwendig, weil sich das
ursprünglich publizierte Protokoll als Artefakt anfällig
herausstellte. Durch die in dieser Arbeit beschriebenen
Protokollveränderungen konnte die für Einzelzell Analysen
notwendige Reproduzierbarkeit erreicht werden. Als Testsystem wurde
eine molekulargenetisch ausreichend charakterisierte und in ihren
Veränderungen stabile Zelllinie gewählt (RCC-26). Die ersten
Versuche zur Einzelzellanalyse zeigten Veränderungen in der
Zelllinie, die in allen vorangegangenen Analysen mit etablierten
Techniken (M-FISH und CGH) nicht gezeigt werden konnten. Eine
Optimierung des Protokolls führte zu übereinstimmenden Ergebnissen
von Einzelzell CGH, CGH und M-FISH. Anschließend konnte die
Reproduzierbarkeit dieser Methode anhand der Zelllinie RCC-26
gezeigt werden. Die Anwendung beider Methoden zur Analyse von
seltenen Zellen wurde mit der Untersuchung von fünf Mammakarzinomen
dargelegt. Der Vergleich von Primärtumor und kultivierten
disseminierten Tumorzellen ins Knochenmark zeigte im Rahmen der
untersuchten Fälle gemeinsame molekulargenetische Veränderungen
beider Tumorentitäten. Mit der Anwendung dieser neuen Methoden ist
es möglich detaillierte Informationen über seltene Zellen zu
erhalten und diese in den biologischen Kontext einzuordnen.

Weitere Episoden

Die Gattung Russula

Die Gattung Russula

vor 21 Jahren
Isolation and characterisation of the intermembrane space components of the mitochondrial TIM22 protein import machinery of Neurospora crassa

Isolation and characterisation of the intermembrane space components of the mitochondrial TIM22 protein import machinery of Neurospora crassa

vor 21 Jahren
Diversität und Abundanz des Ribulose-1,5-bisphosphat Carboxylase/Oxygenase (RubisCO) -Gens cbbL autotropher Bakterien in Agrarböden

Diversität und Abundanz des Ribulose-1,5-bisphosphat Carboxylase/Oxygenase (RubisCO) -Gens cbbL autotropher Bakterien in Agrarböden

vor 21 Jahren
[NiFe]-Hydrogenasen von Escherichia coli: Funktionen der am Metalleinbau beteiligten Proteine

[NiFe]-Hydrogenasen von Escherichia coli: Funktionen der am Metalleinbau beteiligten Proteine

vor 21 Jahren
Identifizierung und Charakterisierung von Tumorprogressionsgenen in einem Pankreastumor-Modellsystem

Identifizierung und Charakterisierung von Tumorprogressionsgenen in einem Pankreastumor-Modellsystem

vor 21 Jahren
Alle Episoden anzeigen
In Podcasts werben
Schalte jetzt Werbung in Podcasts.
Episode melden

„Neue molekularzytogenetische Strategien für die Analyse seltener Zellen“

Worum geht es? Danach fragen wir noch nach dem Grund.

Abonnenten

Teilen

Mein Archiv

Deine Privatkopie der Folgen, die du nicht verlieren willst.

Podcast-Folgen verschwinden. Feeds werden auf die letzten Episoden gekürzt, Hoster räumen alte Dateien ab, Formate wechseln den Anbieter und lassen ihr Archiv zurück. Mit „Mein Archiv“ sichert podcast.de die Folgen deiner Podcasts für dich — angefangen bei den ältesten, denn die sind zuerst weg.

  • Deine gesicherten Folgen bleiben hörbar, auch wenn das Original offline geht.
  • Auch Folgen, die im heutigen Feed gar nicht mehr stehen — podcast.de kennt sie noch.
  • Herunterladen bleibt möglich, solange die Folge beim Podcaster liegt. Der zählt seine Abrufe wie bisher.
Startet bald

Sei beim Start von Mein Archiv dabei

Mein Archiv ist fast fertig. Trag dich ein, dann bekommst du eine E-Mail, sobald es losgeht – und bist von Anfang an dabei. Wir schreiben dir nur zum Start, keine Werbung, keine Weitergabe deiner Daten.

Du bekommst zuerst eine Bestätigungsmail. Abmelden geht jederzeit. Datenschutz